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使用细胞培养耗材实验时避免的4个错误
点击次数:1035 发布时间:2016-11-29
   细胞培养耗材培养细胞
  将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。细胞株数据单之基础培养基种类、血清种类和其它之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。
  细胞培养耗材下面几点初学者易犯错误,这样的现象要避免:
  1.水浴锅未预热或者未预热到37℃。
  2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
  3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
  4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
  将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。
  细胞培养耗材依据细胞种类和浓度,取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。等到实验完成后依一般培养方式再将细胞置入培养箱中或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
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